通用实验室离心机可能会深入到每一个技术相关实验室.是一个潜在发展的市场.应当引起装备管理方面的高度重视。在明确实验室的技术定位、主次技术需求及相应离心方法的前提下,转头形式、最大rcf、rpm、样品量等是选择离心技术的基本参数.要在此基础上考虑离心机的选型、主要功能及兼顾功能的配置
2.1 医学实验室常规离心技术功能需求
2.1.1 RNA 离心制备
培养细胞经低速离心f水平转头.300xg)完成细胞分离、裂解后。加RNA沉淀提取液,于4~C,10000~12000xgf角转头.微量1.5/2.0 ml Eppendorf管。或≥15 ml、50 ml管)分步提取;组织样本需先施匀浆预处理
2.1.2 DNA离心制备
水平转头.2 000xg左右(1.5/2.0 ml Eppendorf管。15 HIl、50 HIl锥底管或更大体积);再经12000~27000xg。制备质粒DNA:角转头,250 ml或500ml/瓶。5000~6000Xg;15~50 ml/管,12000~27000xg:4~C或特定温度。
2.1.3 载体表达蛋白分离
角转头。250~500 ml/瓶,4000xg;15~50 ml锥底管,3000xg;角转头,5O Inl管/瓶,27000~g;4~C。
2.1.4 细胞纯化和亚细胞器分离
用差速离心法分离细胞器和大小差别悬殊的细胞。由低速分步到高速离心.细胞器的沉降顺序是细胞核、线粒体、溶酶体、过氧化酶体、内质网、高尔基体、核蛋白体,所有过程控温
2.1.5 细胞学涂片离心
除专用细胞涂片离心机外.在个别实验室离心机上可配置细胞学涂片离心转头.实现一次1>4片离心。据细胞学特性,rcf控制在50~1000~g。选购时.需注意离心容器的样品处理量是否满足实验目的。
2.1.6 离心超滤、浓缩、抽提
配合市售离心过滤浓缩管f1.5~8O ml,Coming,Millipore,Spectrum等)或样品抽提容器使用。采用角转头或水平转头 角转头可使超滤膜与离心力不成直角而避免浓度极化:1000~12000xg不等.可参考所购容器的使用说明
2.1.7 微孔板离心
酶标板、TC板、PCR板以及样品抽提纯化板的离心。在通用离心机可通过在大容量水平转头上配置微孔板吊架(rcf一般将低于转头的额定值1或选用微板专用离心转头实现.1O00xg左右 每个吊架可放1~4块标准96孑L板或更多,也有可兼做载玻片的离心适配器