eBioscience磷酸化抗体都经过三种buffer(IC fixation and permeabilization, Foxp3/Transcription Factor Buffer, and IC fixation Buffer/Methanol的测试,在抗体说明书上详细告知了最适buffer的种类。由于甲醇会毁坏某些抗体识别的表位,理想的状况是在甲醇作用前做表面marker的标记,这些marker的抗体可以选择甲醇耐受的荧光标记,如eFluor450、FITC或eFluor660。 然而另一方面,表面抗体与细胞的结合可能也会引起不必要的激活。 所以,我们推荐在刺激/处理、固定及甲醇处理之后来做表面抗体的标记,不受固定过程影响的抗体克隆号选择,可参考前面的文章“固定破膜对细胞表面抗体的影响”,来源:http://us.ebioscience.com/resources/application/flow-cytometry/clone-performance-after-fix-perm.htm | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
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