总巯基测定试剂盒
产品名称: 总巯基测定试剂盒
英文名称: Total Mercapto Assay Kit
产品编号: BC1370
产品价格: 0
产品产地: 北京市通州区马驹桥联东U谷85A三
品牌商标: Solarbio
更新时间: 2024-11-22T10:39
使用范围: null
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试剂组成和配制
提取液:液体 50 mL×1 瓶,4℃保存。
试剂一:液体 40 mL×1 瓶,4℃保存。
试剂二:液体 3 mL×1 瓶,4℃避光保存。
样品的制备
(1) 动物、植物组织:按照组织质量(g):提取液体积(mL)为 1:5~10 的比例(建议称 取约 0.1g 组织,加入 1mL 提取液)进行冰浴匀浆,然后 8000g,4℃离心 10min, 取上清,置冰上待测。
(2) 血清,培养液:直接测定。
操作步骤
| 对照管 | 测定管 |
样品(μL) | 200 | 200 |
试剂一(μL) | 750 | 750 |
试剂二(μL) |
| 50 |
H2O(μL) | 50 |
|
混匀,25℃静置 10min, 1cm 光径玻璃比色皿,双蒸水调零,测定 412nm 吸光值,ΔA=A 测定-A 对照。 |
计算公式
总巯基标准曲线:y = 1.7236 x,R 2 = 0.9994
1. 组织:
(1)按样本质量计算
总巯基含量(μmol/g)= 1.7236 DA ×V 反总÷ (V 样÷V 样总×W)=2.9×ΔA÷W
(2)按样本蛋白浓度计算
总巯基含量(μmol/mg prot)= 1.7236 DA ×V 反总÷(V 样×Cpr)=2.9×ΔA÷Cpr
2. 血清、培养液:
总巯基含量(μmol/L)= 1.7236 DA ×V 反总÷V 样×103 =2900×ΔA V 反总:反应总体积,1mL;V 样:反应中样品体积,0.2mL;V 样总:加入提取液体积, 1mL; W:样品质量,g ;Cpr:样本蛋白浓度,mg/mL;103 :1mmol/ L=103 μmol/ L
注意事项 最低检出限为 10μ mol/L