产品内容：
提取液：液体50mL×1 瓶，4℃保存。 
试剂一：液体 25mL×1 瓶，4℃保存。 
试剂二：液体 15mL×1 瓶，4℃保存。 
试剂三：液体 15mL×1 瓶，4℃避光保存。 
试剂四：液体15mL×1 瓶，4℃保存。 
试剂五：液体 3mL×1 管，4℃避光保存。 
产品说明：
H2S 是一种新型气态信号分子，存在于脑内的神经递质，生理浓度的 H2S 对神经系统海马的长时程增强功能具有重要的调节作用，并对自发性高血压、出血性休克及肝硬化等疾病的过程发挥着重要的病理生理效应。 
H2S 与醋酸锌、N, N-二甲基对苯二胺和硫酸铁铵等反应生成亚甲基蓝，亚甲基蓝在 665nm处有最大吸收峰，通过测定其吸光值可计算 H2S 含量。
自备仪器和用品：
天平、低温离心机、可见分光光度计1mL玻璃比色皿、蒸馏水。
操作步骤：
一、样品处理： 
1. 组织：按照组织质量（g）：提取液体积(mL)为 1：5~10 的比例（建议称取约 0.1g 组织，加入 1mL 提取液）进行冰浴匀浆，然后 10000g，4℃离心 10min，取上清，置冰上待测。 
2. 细菌、真菌：按照细胞数量（10 4个）：提取液体积（mL）为 500~1000：1 的比例（建议 500 万细胞加入 1mL 提取液），冰浴超声波破碎细胞（功率 300w，超声 3 秒，间隔 7秒，总时间 3min）；然后 10000g，4℃，离心 10min，取上清置于冰上待测。 
3. 血清（浆）：直接测定。
二、测定步骤： （取1.5mL离心管，按照下表操作） 
 
 
空白管
测定管
样品（μL）
 
25
H2O（μL）
25
 
试剂一（μL）
25
25
充分震荡混匀
试剂二（μL）
25
25
12000rpm，4℃，离心 10min，去上清，留沉淀
H2O（μL）
500
500
12000rpm，4℃，离心 10min，去上清，留沉淀
试剂一（μL）
25
25
试剂三（μL）
25
25
充分震荡混匀
试剂四（μL）
25
25
12000rpm，4℃，离心10min，取上清
试剂五（μL）
50
50
混匀，25℃静置20min，于微量石英比色皿/96孔板中，空白管调零，测定665nm吸光值，记为A665。
 
三、H2S含量计算公式：
标准曲线回归方程为：y = 0.0044x，R2 = 0.9988 
（1）组织样品 
a.按照蛋白浓度计算 
H2S（μmol/mg prot）= A665÷0.0044×V反总÷(V样×Cpr)×10-3=0.727×A665÷Cpr 
b.按照样本重量计算 
H2S（μmol/g）= A665÷0.0044×V反总÷(V样÷V样总×W)×10-3 = 0.727×A665÷W 
（2）液体样本
 H2S（μmol/L）= A665÷0.0044×V反总÷V样= 727×A665 
（3）细胞 
H2S（μmol/104 cell）= A665÷0.0044×V反总÷（V样÷V样总×细胞数量(万个)）×10-3 
=0.727×A665÷细胞数量（万个）
V反总：反应总体积，0.8mL；V样：反应中样品体积，0.25mLTUNEology 波长可调检测卡盒-->