试剂组成： 
提取液：液体 100mL×1 瓶，4℃保存； 
试剂一：液体 19.2mL×1 瓶，4℃保存； 
试剂二：液体 4mL×1 瓶，4℃保存； 
试剂三：液体 1mL×1 支，4℃保存；
产品说明： 
GOD（EC1.1.3.4）广泛存在于动物、和植物中，催化葡萄糖氧化生成葡萄糖酸，并产生 H2O2， 是生物体中产生活性氧的代谢途径之一。 
GOD 催化产生 H2O2，过氧化物酶在有氧存在时催化 H2O2分解产生的氧又将邻联茴香胺氧化生 成有色物质，颜色深浅与葡萄糖氧化酶活性成线性关系。 
 
试验中所需的仪器和设备 
可见分光光度计/酶标仪、水浴锅、台式离心机、可调式移液器、微量石英比色皿/96 孔板、研 钵、冰、蒸馏水
操作步骤： 
一、样品测定的准备： 
1. 组织处理：按照组织质量（g）：提取液体积(mL)为 1：5~10 的比例（建议称取约 0.1g 组织，加 入 1mL 提取液），进行冰浴匀浆。8000g4℃离心 10min，取上清，置冰上待测。 2. 血清（浆）：直接检测。
 
二、测定步骤： 
1、 分光光度计或酶标仪预热 30min 以上，调节波长至 500nm，蒸馏水调零。 
2、 GOD 检测工作液的配制：用时将试剂二和试剂三转移至试剂一中，充分混匀，待用；用不完 的试剂 4℃可保存一周； 
3、测定前将 GOD 检测工作液在 37℃（哺乳动物）或 25℃（其它物种）水浴 10min 以上。 
4、在微量石英比色皿或 96 孔板中加入 10μL 样本和 240μL 工作液，立即混匀并计时，记录 500nm 下 20s 吸光值 A1 和 1min20s 后的吸光值 A2。计算ΔA＝A2-A1。 
 
GOD 活力单位的计算 
a.用微量石英比色皿测定的计算公式如下 
1、血清（浆）GOD 活力的计算 
单位定义：每 mL 血清（浆）每分钟催化产生 1nmol 氧化型邻联茴香胺为一个酶活力单位。
GOD（nmol/min/mL）=[ΔA×V 反总÷（ε×d）×109]÷V 样÷T=3333×ΔA 
2、动物组织 GOD 活力的计算 
（1）按蛋白浓度计算 
单位定义：每 mg 组织蛋白每分钟催化产生 1nmol 氧化型邻联茴香胺为一个酶活力单位。 GOD（nmol/min/mgprot）=[ΔA×V 反总÷（ε×d）×109]÷(V 样×Cpr)÷T=3333×ΔA÷Cpr 
（2）按样本鲜重计算 
单位定义：每 g 组织每分钟催化产生 1nmol 氧化型邻联茴香胺为一个酶活力单位。 
GOD（nmol/min/g 鲜重）=[ΔA×V 反总÷（ε×d）×109]÷（W×V 样÷V 样总）÷T=3333×ΔA÷W V 反总：反应体系总体积，2.5×10-4 L；ε：氧化型邻联茴香胺摩尔消光系数，7.5×103 L/mol/cm；d： 比色皿光径，1cm；V 样：加入样本体积，0.01mL；V 样总：加入提取液体积，1mL；T：反应时 间，1min； Cpr：样本蛋白质浓度，mg/mL；W：样本质量，g。 
 
b.用 96 孔板测定的计算公式如下 
1、血清（浆）GOD 活力的计算 
单位定义：每 mL 血清（浆）每分钟催化产生 1nmol 氧化型邻联茴香胺为一个酶活力单位。 GOD（nmol/min/mL）=[ΔA×V 反总÷（ε×d）×109]÷V 样÷T=6666×ΔA 
2、动物组织 GOD 活力的计算 
（1）按蛋白浓度计算 
单位定义：每 mg 组织蛋白每分钟催化产生 1nmol 氧化型邻联茴香胺为一个酶活力单位。 
GOD（nmol/min/mgprot）=[ΔA×V 反总÷（ε×d）×109]÷(V 样×Cpr)÷T=6666×ΔA÷Cpr 
（2）按样本鲜重计算 单位定义：每 g 组织每分钟催化产生 1nmol 氧化型邻联茴香胺为一个酶活力单位。 
GOD（nmol/min/g 鲜重）=[ΔA×V 反总÷（ε×d）×109]÷（W×V 样÷V 样总）÷T=6666×ΔA÷W V 反总：反应体系总体积，2.5×10-4 L；ε：氧化型邻联茴香胺摩尔消光系数，7.5×103 L/mol/cm；d： 96 孔板光径，0.5cm；V 样：加入样本体积，0.01mL；V 样总：加入提取液体积，1mL；T：反 应时间，1min；Cpr：样本蛋白质浓度，mg/mL；W：样本质量，g。
相关文献：
《Cloning, deletion, and overexpression of a glucose oxidase gene in Aureobasidium sp. P6 for Ca2+-gluconic acid overproduction》 作者:Yan Ma1 & Zhe Chi1 & Yan-Feng Li1 & Hong Jiang1 & Guang-Lei Liu1 & Zhong Hu2 & Zhen-Ming Chi 期刊:Annals of Microbiology 影响因子:1.431 PMID: