高纯度质粒中量快速提取试剂盒（离心柱型）产品介绍

    本试剂盒采用改进SDS-碱裂解法裂解细胞，离心吸附柱内的硅基质膜在高盐、低pH值状态下选择性地结合溶液中的质粒DNA，再通过去蛋白液和漂洗液将杂质和其它细菌成分去除，最后低盐、高pH的洗脱缓冲液将纯净质粒DNA从硅基质膜上洗脱。 

 高纯度质粒中量快速提取试剂盒（离心柱型）产品特点
    1. 离心吸附柱内硅基质膜全部采用进口世界著名公司特制吸附膜，柱与柱之间吸附量差异极小，可重复性好。克服了国产试剂盒膜质量不稳定
      的弊端。
    2. 不需要使用有毒的苯酚、氯仿等试剂，也不需要乙醇沉淀。快速、方便，从50ml大肠杆菌LB((Luria-Bertani)培养液中，可快速提取0.2-
      0.5mg纯净的高拷贝质粒DNA，提取率达80%左右。
    3. 获得的质粒产量高、超螺旋比例高、纯度好，可以直接用于酶切、转化、PCR、体外转录、测序等各种分子生物学实验。 

 高纯度质粒中量快速提取试剂盒（离心柱型）产品储存
    本产品收到后按照说明书指示温度存放各成份，储存18个月不影响使用效果。 
 

自备试剂

    无水乙醇

注意事项

    1. 所有的离心步骤如未加另外说明均在室温完成，使用转速可以达到至少6,000xg，带50ml转头的台式离心机。

    2. 溶液P3和去蛋白液PD中含有刺激性化合物，操作时要戴乳胶手套，避免沾染皮肤、眼睛和衣服。若沾染皮肤、眼睛时，要用大量清水或者生

       理盐水冲洗。

    3. 提取质粒的量与细菌培养浓度、质粒拷贝数等因素有关。如果所提质粒为低拷贝质粒或大于10kb的大质粒，应加大菌体使用量，同时按比例

       增加P1、P2、P3的用量，洗脱缓冲液应在70℃预热。可以适当的延长吸附和洗脱的时间，提高提取效率。

    4. 得到的质粒DNA可用琼脂糖凝胶电泳和紫外分光光度计检测浓度与纯度。OD260值为1相当于大约50μg/ml DNA。电泳可能为单一条带，也可

       能为2条或者多条DNA条带，这主要是不同程度的超螺旋构象质粒泳动位置不一造成，与提取物培养时间长短、提取时操作剧烈程度等有关。

       本公司产品正常操作情况下基本超螺旋可以超过90%。

    5. 质粒DNA确切分子大小，必须酶切线性化后，对比DNA分子量Marker才可以知道。处于环状或者超螺旋状态的质粒，泳动位置不确定，无法通

       过电泳知道其确切大小。

    6. 洗脱液EB不含有螯合剂EDTA，不影响下游酶切、连接等反应。也可以使用水洗脱，但应该确保pH大于7.5，pH过低影响洗脱效率。用水

       洗脱，质粒应该保存－20℃。质粒DNA如果需要长期保存，可以用TE缓冲液洗脱 （10mMTris-HCl，1mM EDTA，pH 8.0），但是EDTA可能影响

       下游酶切反应，使用时可以适当稀释。 高纯度质粒中量快速提取试剂盒（离心柱型）