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展位号: BIOON-313428144484
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联系人:王赫
地 址:南京市栖霞区生命科技创新园F7楼6层
电 话:15261805068
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构建慢病毒Cas9表达体系可以有效的将Cas9转入细胞,并高效表达。为第二步转入识别靶点的gRNA筛选阳性细胞的抗性基因或荧光基因,用于同源重组模板,降低了难度。
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根据给定GeneID或DNA序列,设计3个敲除位点构建敲除载体,通过测序验证载体是否构建成功。在构建成功的基础上,提取去内毒素质粒并转染细胞,进行敲除效率验证。
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根据给定GeneID或DNA序列,需要插入的DNA序列,以及插入位置。在插入位置位置附近设计3个sgRNA以及donor并构建载体、转染细胞、单克隆的分选。最终通过测序验证是否得到插入的细胞系。
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根据给定GeneID或序列以及点突变信息设计sgRNA和Donor、构建载体、转染细胞、单克隆分选、点突变细胞系建立。
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慢病毒是以HIV-1(人类免疫缺陷1型病毒)为基础发展起来的。将目标基因包装到用于过表达的慢病毒中,可以有效感染各种细胞,同时达到稳定遗传的效果。
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根据给定GeneID或DNA序列,设计3个敲除位点,合成正负Oligo DNA,构建敲除载体,通过测序验证载体是否构建成功。在构建成功的基础上,中量摇菌,提取去内毒素载体。
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